CETSA-MS

CETSA（Cellular Thermal Shift Assay，细胞热迁移实验）技术质谱联用原理示意图

 天然状态的蛋白质在温度升高时会发生变性、聚集并沉淀，从可溶性转为不可溶性，而当药物 / 小分子配体与靶蛋白特异性结合后，会稳定蛋白构象，显著提高其热稳定性，使其熔解温度（Tm 值）升高。通过将药物处理组与对照组细胞（或裂解液）进行梯度温度加热，未结合配体的蛋白在较低温度即变性沉淀；结合配体的蛋白则保持可溶性。离心分离可溶性蛋白上清，利用高通量定量质谱对全蛋白质组进行定性与定量。

1.       靶点发现（Deconvolution）：天然产物、中药单体、老药新用的未知靶点全局筛选。

2.       靶点验证（Target Validation）：确认药物与已知靶点在活细胞内的特异性结合。

3.       脱靶效应（Off-target）分析：全面鉴定药物非特异性结合蛋白，评估安全性与副作用。

4.       化合物构效关系（SAR）：比较系列衍生物的靶点亲和力与选择性，指导药物优化。

5.       耐药机制研究：分析耐药株与野生株的蛋白热稳定性差异，揭示耐药靶点。

1.       生理原位，真实可靠；

2.       无标记、无修饰；

3.       全局无偏筛选；

4.       无需蛋白纯化；

5.       直接功能性证据。

1、团队经验丰富，成员稳定；
2、提供原始数据以及试验记录，保证数据真实可靠。

文献解读分享：A Pseudomonas aeruginosa quorum-sensing metabolite manipulates macrophage ferroptosis through a methylation pathway, Nat Commun, 2025年，1区，15.7分。