划痕实验

细胞划痕实验（Cell scratch assay）：因其类似体外伤口愈合过程，又名伤口愈合实验（Wound healing assay），是指细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的梯度后而产生的移动。在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕/伤口”，划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕/伤口”愈合，于细胞迁移过程中在开始和定期捕获图像，通过测量不同时间点的划痕间距并计算差值，可对细胞的迁移能力做出判断。可用于可以观察药物、基因等外源因素对细胞迁移、修复和相互作用的影响。

 1、于六孔板底面，马克笔顺直尺画三条横线作为标记线，取处于对数生长期且状态良好的细胞，在6孔板内进行铺板处理，细胞密度约为5*10^5细胞/板；
 2、待细胞长满后，用直尺比着，200ul枪头垂直于孔板和画的标记线划两条垂线，使划痕与标记线相交，可以形成若干交叉点，作为固定的检测点；
 3、弃去旧培养基，用PBS轻轻润洗两到三次，直到划下来的细胞冲洗干净，加入新鲜培养基；
 4、对划痕完毕的细胞，按照实验分组进行处理，每组三个重复，并进行拍照处理（此时记为0 h）；
 5、继续培养细胞，按照不同时间梯度，对细胞进行拍照处理；
 6、利用Image J及GraphPad软件对划痕数据进行处理并成图。

 1、团队经验丰富，成员稳定；
 2、提供原始数据以及试验记录，保证数据真实可靠；
 3、实验进行三重复，保证数据的可重复性。